Дослідження синтезу β-лактамази ТЕМ1 у різних штамах Escherichia coli при зараженні їх фагом λbla з амбер-мутаціями в регуляторних генах

Сорочинська, Т. В.; Черних, С. І.

doi:10.7124/bc.0002BA

Biopolym. Cell. 1991; 7(1):101-107.

http://dx.doi.org/10.7124/bc.0002BA

Генно-інженерна біотехнологія

Дослідження синтезу β-лактамази ТЕМ1 у різних штамах Escherichia coli при зараженні їх фагом λbla з амбер-мутаціями в регуляторних генах

1Сорочинська Т. В., 1Черних С. І.

Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
Вул. Академіка Заболотного, 150, Київ, Україна, 03680

Abstract

Проведено пошук оптимальних умов для функціонування системи фагозалежної синтезу β - лактамази. Для цього були виділені рекомбінантні фаги λbla, в яких структурний ген β- лактамази ( bla ) орієнтований альтернативно. Встановлено, що ефективна експресія bla-гена спостерігається в конструкції , де він контролюється сильними lac^– і P_L-промоторами фага λ . Отримано N^– і QR^– похідні фага ?bla . Здійснено підбір штаму – продуцента β-лактамази. Максимальний вихід β- лактамази спостерігається при інфікуванні бессупрессорного штаму Е. coli W3101 фагом λblaQ^–R^– .

Повний текст: (PDF, російською)

References

[1] Glushakova LG, Chernykh SI, Stelmashenko LN, Kordium VA. beta-galactosidase supersynthesis indiced by some amber mutation of phage lambda plac3Cl857. Molekulyarnaya biologiya (Kiev). 1982;30:37-41.

[2] Glushakova LG, Chernykh SI, Kordium VA. Functioning of N-derivatives of phage plac3Cl857 in E. coli Suo. Dokl Akad Nauk SSSR. 1982; 267(12):56-9.

[3] Kordium VA, Glushakova LG, Chernykh SI. Use of N-derivatives of lambda plac 5 phage for the purpose of beta-galactosidase supersynthesis. Dokl Akad Nauk SSSR. 1980;255(3):760-3.

[4] Davison J, Brammar WJ, Brunel F. Quantitative aspects of gene expression in a lambda-trp fusion operon. Mol Gen Genet. 1974;130(1):9-20.

[5] Murray NE, Kelley WS. Characterization of lambdapolA transducing phages; effective expression of the E. coli polA gene. Mol Gen Genet. 1979;175(1):77-87.

[6] Clewell DB, Helinski DR. Supercoiled circular DNA-protein complex in Escherichia coli: purification and induced conversion to an opern circular DNA form. Proc Natl Acad Sci U S A. 1969;62(4):1159-66.

[7] Maniatis T, Fritsch EF, Sambrook J. Molecular cloning: a laboratory manual. New York: Cold Spring Harbor Lab, 1982; 545 p.

[8] Dagert M, Ehrlich SD. Prolonged incubation in calcium chloride improves the competence of Escherichia coli cells. Gene. 1979;6(1):23-8.

[9] Miller JH. Experiments in molecular genetics. Cold Spring Harbor Laboratory, 1972, 466 p.

[10] Chaikovskaia SM, Venkina TG. A modified iodometric method for the determination of penicillinase activity. Antibiotiki. 1962;7:453-6.

[11] Gottesman ME, Adhya S, Das A. Transcription antitermination by bacteriophage lambda N gene product. J Mol Biol. 1980;140(1):57-75.

[12] Honigman A. Cloning and characterization of a transcription termination signal in bacteriophage lambda unresponsive to the N gene product. Gene. 1981;13(3):299-309.

[13] Dambly-Chaudière C, Gottesman M, Debouck C, Adhya S. Regulation of the pR operon of bacteriophage lambda. J Mol Appl Genet. 1983;2(1):45-56.

[14] Drahos D, Szybalski W. Antitermination and termination functions of the cloned nutL, N, and tL1 modules of coliphage lambda. Gene. 1981;16(1-3):261-74.

[15] Salstrom JS, Szybalski W. Coliphage lambdanutL-: a unique class of mutants defective in the site of gene N product utilization for antitermination of leftward transcription. J Mol Biol. 1978;124(1):195-221.

[16] The Bacteriophage lambda. Ed. A. D. Hershey. N. Y. Cold Spring Harbor Lab, 1971. NLM ID: 0313535

[17] Kleckner N, Signer ER. Genetic characterization of plasmid formation by N- mutants of bacteriophage lambda. Virology. 1977;79(1):160-73.

[18] Herskowitz I, Signer ER. A site essential for expression of all late genes in bacteriophage lambda. J Mol Biol. 1970;47(3):545-56.

[19] Grayhack EJ, Roberts JW. The phage lambda Q gene product: activity of a transcription antiterminator in vitro. Cell. 1982;30(2):637-48.

[20] Dambly C, Delstanche M, Gathoye AM. qin101: Promoter mutation which allows the constitutive expression of the late genes. J Virol. 1979;30(1):14-20.

[21] Bienkowska-Szewczyk K, Lipinska B, Taylor A. The R gene product of bacteriophage lambda is the murein transglycosylase. Mol Gen Genet. 1981;184(1):111-4.

[22] Moir A, Brammar WJ. The use of specialised transducing phages in the amplification of enzyme production. Mol Gen Genet. 1976;149(1):87-99.

[23] Lieb M. Lambda mutants which persist as plasmids. J Virol. 1970;6(2):218-25.