Note! This is an old version of B&C site.
Biopolym. Cell. 2020; 36(2):122-132.
Методи
Вітрифікація тканини яєчка щурів з використанням біополімерів
1Волкова Н. О., 1Юхта М. С., 1Гольцев А. М.
  1. Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
    23, Переяслівська вул., Харків, Україна, 61015
Мета. Проведення порівняльної оцінки впливу кріоконсервування шляхом вітрифікації на морфофункціональні характеристики незрілої тканини яєчок щурів під захистом кріосередовищ на основі біополімерних гелів. Методи. Зразки яєчок статевонезрілих щурів були швидко занурені в рідкий азот під захистом кріосередовища 1 (15 % ДМСО + 18 % гліцерин + 0,5 М сахароза) або кріосередовища 2 (15 % ДМСО + 18 % гліцерин + 15 % ПЕО) на основі біополімерів (бичачий сироватковий альбумін (БСА), колаген (КГ) або фібриновий (ФГ) гель). Групи порівняння: інтактний контроль і фрагменти, вітрифіковані в розчині Хенкса. Результати. На відміну від БСА та КГ, ФГ мав більш виражений протекторний ефект. Його поєднання з кріосередовищем 1 призвело до зниження ступеня ретракції та десквамації сперматогенного епітелію, а також до збільшення щільності клітин у ньому в 3 рази порівняно з негативним контролем. За даними MTT-тесту метаболічна активність тканин яєчка, вітрифікованих під захистом ФГ та кріосередовища 1, зросла в 2,75 рази порівняно з негативним контролем (БСА та КГ з цим кріосередовище – в 2,1 та 2,0 рази відповідно). Аналогічна тенденція спостерігалася при дослідженні активності ЛДГ. Біополімери з кріосередовищем 2 мали позитивний ефект при гістологічному дослідженні, але не сприяли збереженню метаболічної активності клітин сперматогенного епітелію. Висновок. Кріосередовище 1 на основі фібринового гелю виявилася найбільш оптимальним серед усіх вивчених комбінацій біополімерів і кріопротекторів. Отримані дані можуть бути використані для обґрунтування і розробки ефективних методів вітрифікації сім’яних канальців людини з використанням біополімерів.
Keywords: незріла тканину яєчка, сперматогенний епітелій, кріозахисне середовище, колагеновий гель, фібриновий гель, метаболічна активність